凝胶电泳误差源

凝胶电泳是分子生物学中用于DNA分析的主要方法之一。此方法涉及DNA片段通过凝胶的迁移,在凝胶中它们根据大小或形状分开。但是,即使是科学上合理的方法,例如凝胶电泳,也无法避免错误。

电泳如何工作

DNA可以使用凝胶电泳进行分析。
•••

凝胶电泳涉及使用通常由聚合物如琼脂糖制成的凝胶。将凝胶浸入传导电场的缓冲溶液中。**先使用限制酶将目标DNA样品片段化,然后注入凝胶中。打开电场后,凝胶中的DNA片段会向正极迁移。如果DNA片段大小不同,则每个大小片段的迁移时间都会不同。然后使用染料或放射自显影将片段可视化,并在凝胶中显示为条带。

样品污染

微量移液器通常用于将样品注入凝胶。
•••

电泳法的主要应用是在分子生物学中分析DNA的工具,但在法医学中也用作鉴定犯罪现场样本的手段。为了获得准确的结果,**小化此技术中的错误来源很重要。错误的来源之一是DNA样品的污染。如果样品中有外源DNA,则凝胶中的条带比仅包含纯化样品的凝胶中的带多。

凝胶,电流和缓冲液问题

电源稳压器用于保持凝胶电泳中的电压稳定。
•••

凝胶的浓度也**正确以避免错误。如果浓度太高或太低,碎片将迁移得太慢或太快。这将导致解析不同频段时出现错误。在电泳过程中,**注意确保电压稳定。电压的任何波动都将导致DNA片段不稳定迁移,从而导致条带读取错误。缓冲溶液还**具有正确的组成,因为具有错误pH或离子浓度的缓冲液会改变DNA片段的形状,并改变其迁移时间。

正确的可视化

可视化凝胶中的每个条带代表一组大小相同的DNA片段。
•••

**重要的是,凝胶**正确可视化。如果用于可视化样品的染料或放射性探针的浓度太高,则生成的图像将非常混乱,因为残留碎片也将可视化。如果凝胶浓度太低,将无法可视化。在所有阶段都遵循正确的过程后,凝胶电泳仪将得出准确且可以放心使用的结果。与所有科学程序一样,凝胶电泳容易出错,但可以通过适当的准备和操作将其**小化。


XML 地图 | Sitemap 地图